竹节参皂苷不同浓度乙醇洗脱物对肝细胞损伤的保护作用

目的：研究不同浓度竹节参总皂苷对游离脂肪酸诱导的肝细胞（ HepG2）损伤的保护作用。方法制备竹节参总皂苷不同浓度乙醇洗脱（10％、30％、60％及90％）的有效部位，应用棕榈酸（ PA ）诱导肝癌细胞HepG2脂肪变性的细胞模型（模型组），正常组应用DMSO。提取细胞总RNA检测内质网应激标志基因葡萄糖调节蛋白（ GRP－78）、CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（ CHOP）以及肿瘤坏死因子α（ TNF－α）的表达水平，通过噻唑蓝（ MTT）方法反映细胞存活状况，以及油红O染色，观察细胞脂肪变性情况。结果 MTT结果显示模型组与正常组比较，HepG2细胞存活率明显降低，竹节参提取物中，90％乙醇洗脱组的细胞存活率较模型组明显升高，差异有统计学意义；油红O染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少，细胞肿胀减轻，细胞数目增多，而其他萃取部位效果不明显；RT－PCR显示，模型组内质网应激相关基因表达量明显高于正常组，而竹节参90％乙醇萃取部位则较模型组有明显降低，与正常组比较差异无统计学意义。90％乙醇洗脱组经高效液相色谱法（ HPLC）测定，其主要成分为齐墩果烷型皂苷。结论竹节参齐墩果烷型皂苷能明显降低PA诱导的HepG2细胞脂肪变性，其机制与干预内质网应激相关。