小鼠结肠 Cajal 间质细胞的体外分离、培养和鉴定

目的：建立小鼠结肠Cajal间质细胞（ ICC）体外分离、培养和鉴定的方法。方法无菌条件下，取出生后9～12 d的C57BL／6小鼠结肠组织，在解剖显微镜下分离结肠肌层组织、消化和进行原代培养。显微镜下连续观察细胞形态，使用酪氨酸蛋白激酶受体c－kit抗体行免疫组织化学研究鉴定细胞类型。结果体外培养24 h后，显微镜下可见三角形或梭型细胞贴壁生长。有2～3个短突起。继续培养，72 h后可见ICC胞体发出3～5条突起，细胞间相互连接。7 d后，细胞间形成密集的网状结构。共聚焦显微镜下观察该类细胞c－kit抗体免疫荧光染色呈阳性。结论成功建立了一套由小鼠结肠平滑肌原代培养ICC的方法，为研究及探讨相关疾病奠定了基础。