流行性乙型脑炎／登革病毒1型嵌合基因的构建和鉴定

目的：构建和鉴定流行性乙型脑炎（乙脑）／登革病毒1型（ DV1）／JEV prME嵌合基因。方法利用分子生物学技术构建登革病毒和乙脑病毒嵌合的prME嵌合基因，重叠PCR法鉴定；在质粒载体pcDNA3．1（＋）的基础上，构建表达pcDV1／JEV prME的重组质粒载体，利用LipofectamineTM2000将登革／乙脑prME嵌合质粒转染至BHK－21细胞，间接免疫荧光法检测prME蛋白在细胞中的表达。结果 DNA测序结果证实pcDV1／JEV prME重组质粒完全正确，成功构建的登革／乙脑嵌合质粒在BHK－21细胞中能够表达prME蛋白。结论通过一系列的鉴定手段，可以认定本实验中构建的登革／乙脑嵌合质粒能够在真核细胞中顺利表达。