siRNA-SRF对人肺癌A549增殖和侵袭的影响

目的 研究siRNA-SRF对肺癌A549增殖和侵袭能力的影响.方法 应用RNAi技术基因沉默SRF,观察其对肺癌A549细胞增殖和侵袭的影响.设计并合成4条siRNA(SRF-900,SRF-901,SRF-1107和SRF-1649).采用Realtime PCR筛选沉默效率最高的siRNA用于后续研究,采用免疫细胞化学染色和western blot进行验证.采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 设计合成的4条针对SRF的siRNA(900、901、1107、1649)均能有效下调A549细胞SRF mRNA的表达,分别为空白对照组的56.4％、36.4％、25.0％和53.6％,差异有统计学意义(P<0.05).免疫细胞化学染色显示SRF定位于细胞核,应用siRNA后SRF阳性染色显著减少,Western blot结果显示转染siRNA后SRF蛋白下调为空白对照组的40.1％,差异有统计学意义(P<0.05).与空白对照组、阴性对照组和转染对照组相比,siRNA-1107转染组细胞增殖明显受抑,抑制率为64.24％,细胞周期S期比例明显下调,侵袭细胞数为空白对照组的41.7％,差异有统计学意义(P<0.05).结论 采用RNA干扰技术基因沉默SRF能够显著抑制A549细胞增殖和侵袭能力.