柚皮素对氧化应激所致成骨细胞凋亡的影响及机制研究

目的：观察柚皮素对氧化应激导致的成骨细胞凋亡的影响，并探讨其机制。方法体外分离培养成骨细胞，细胞分空白对照组、单纯 H2 O2作用组、H2 O2＋0 J．1μmol／L 柚皮素组、H2 O2＋1μmol／L柚皮素组、H2 O2＋10μmol／L柚皮素组。 MTT法检测成骨细胞活力；流式细胞术检测成骨细胞凋亡率；荧光显微镜观察活性氧（ ROS）含量；比色法检测丙二醛（ MDA）含量；Real time-PCR和Western-blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达情况。结果与空白对照组比较，单纯H2 O2处理组细胞活性明显降低，凋亡率及ROS、MDA含量明显增加；同时Bcl-2 mR-NA和蛋白表达明显下调，Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达明显上调（ P ＜0．05）。与单纯H2 O2处理组比较，柚皮素预处理24 h能够明显增强细胞活性，降低细胞凋亡率及ROS、MDA含量，上调Bcl-2 mRNA和蛋白表达，下调Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达，呈剂量依赖性（ P ＜0．05）。结论柚皮素在氧化应激条件下能够促进成骨细胞增殖，抑制成骨细胞凋亡，其机制与上调Bcl-2表达，下调Bax、Caspase-3表达有关。