miR-320a-5p对高脂饮食诱导的小鼠肥胖和IR的影响研究
Chongqing Medicine(2020)
Abstract
目的 探讨miR-320a-5p对高脂饮食(HFD)诱导的小鼠肥胖和胰岛素抵抗(IR)的影响.方法 45只雄性C57BL/6小鼠分为对照(ND)组、HFD组和mmu-miR-320a-5p agomir(MA)组.以HFD喂养8周后,HFD组尾静脉注射20 nmol/L的miRNA激动剂的阴性对照(micrONTM miRNA agomir NC)的100μL磷酸盐缓冲液,MA组注射等量mmu-miR-320a-5p agomir,直至20周.期间监测小鼠体重变化,分析3组小鼠20周腰围、代谢水平、胰岛素耐受实验(IPTT)、口服糖耐量实验(OGTT)情况;苏木素-伊红(HE)染色检测脂肪组织形态学变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组外周血和脂肪组织miR-320a-5p相对表达水平及Pparg、Ppara、Cebpa、Cebpb基因mRNA表达水平;ELISA检测外周血胰岛素样生长因子-1(Igf-1)水平;West-ern blot检测脂肪组织Igf-1、Phospho-Igf-1-rβ/Irβ(Tyr1131/1146)、Phospho-Irs1(Tyr1222)、Phospho-Gsk3(Ser9)、Phospho-PI3K p85/p55(Tyr458/199)、Phospho-Akt(Thr308)、phospho-FoxO1(Ser256)、Ppar-γ、Gck、G6Pase和Pepkc蛋白表达水平.结果 与HFD组比较,MA组小鼠的腰围、内脏脂肪组织(eWAT)湿重、胰岛素水平和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)更低,体温热量输出值、呼吸熵、糖耐量、血糖清除速率和eWAT中miR-320a-5p水平更高,差异有统计学意义(P<0.05).与HFD组比较,MA组外周血Igf-1水平,eWAT中Igf-1、Phospho-Igf-1-rβ/Irβ(Tyr1131/1146)、Phospho-Irs1(Tyr1222)、Phospho-Gsk3β(Ser9)、Phospho-PI3K p85/p55(Tyr458/199)、Phospho-Akt(Thr308)、Gck、G6Pase和Pepck蛋白及Pparg、Ppara、Cebpa和Cebpb基因mRNA水平更低,Phospho-FoxO1(Ser256)水平更高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 上调miR-320a-5p可抑制HFD小鼠的肥胖和IR.
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