丹参凝集素促进血管平滑肌细胞的增殖机制研究

目的 探究丹参凝集素蛋白(SMLP)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响机制.方法 通过蛋白分离纯化技术从中药丹参中分离得到具有活性的凝集素蛋白,噻唑蓝(MTT)法检测SMLP对大鼠VSMCs的增殖作用,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关增殖基因的表达水平.构建pet-28a-sml原核表达载体,利用蛋白质亲和层析等技术纯化体外表达的SMLP,并通过红细胞凝集实验确认纯化的SMLP的活性.结果 丹参中分离的SMLP能够促进大鼠VSMCs增殖,增殖相关基因蛋白激酶B(AKT)基因与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化水平明显增加,而凋亡相关基因JNK1和Bax表达水平明显降低.成功构建了pet-28a-smlp原核表达载体,并在体外表达纯化了SMLP;红细胞凝集实验表明,体外表达纯化的SMLP具有活性.结论 SMLP能够促进大鼠VSMCs的增殖;成功建立SMLP的体外表达纯化方法,为进一步研究其功能奠定了基础.