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hADRB3重组腺病毒的构建及经心包注射后hADRB3在CHF大鼠体内的表达

Chongqing Medicine(2019)

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Abstract
目的 构建携带人β3-肾上腺素受体基因(hADRB3)的高滴度纯化重组腺病毒Ad-hADRB3,并观察经心包注射后hADRB3在慢性心力衰竭(CHF)大鼠体内的表达.方法 HindⅢ、SalI双酶切hADRB3 cD-NA质粒获得hADRB3目的基因片段,应用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Ad-hADRB3,测定纯化后的病毒滴度.将CHF成模大鼠10只随机分为两组,观察组单次心包注射2.50×1011 VP/mL NS Ad-hADRB3 100 μL,对照组予以心包注射0.90% NaC1 100 μL,7d后免疫组织化学(IHC)检测hADRB3在CHF大鼠体内的表达情况.结果 成功构建重组腺病毒Ad-hADRB3,纯化后滴度达到5.20×1012 VP/mL.单次心包注射Ad-hADRB3,CHF大鼠心、肝、肺、肾、脾及小肠均检测到hADRB3的表达.结论 腺病毒介导的外源hADRB3基因经心包注射后,可在CHF大鼠多脏器中表达.
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