Map3k1基因下调对B6小鼠眼睑角质形成细胞增殖和迁移能力的影响

目的 为了研究靶向抑制M ap3k1基因对B6小鼠眼睑角质形成细胞增殖和迁移能力的影响.方法 通过已构建的靶向沉默Map3k1基因amiRNA干扰载体,Lipofectamin 2000转染B6小鼠眼睑角质形成细胞(Ctrl Map3k1组转染空载体, Map3k1 amiRNA-3组转染Map3k1 amiRNA-3干扰载体);Real-Time PCR和Western blot实验分别检测Map3k1 mRNA和蛋白的相对表达量,以测定干扰效率;四甲基偶氮唑盐(M T T)法检测B6小鼠眼睑角质形成细胞的增殖水平;划痕实验检测角质形成细胞的迁移能力.结果 B6小鼠眼睑角质形成细胞转染Map3k1 amiRNA-3干扰载体后,mRNA和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.05);Map3k1 amiRNA-3组在细胞增殖水平上低于Ctrl Map3k1组(P<0.05);Map3k1 amiRNA-3组在迁移能力上亦显著低于Ctrl Map3k1组(P<0.05).结论 靶向抑制B6小鼠眼睑角质形成细胞中Map3k1基因的表达后显著抑制细胞的增殖和迁移,进而影响细胞的生物学行为.