人脐带间充质干细胞体外分离培养及其生物学特性的研究

目的：研究人脐带间充质干细胞（MSCs）详细的生物学特性，包括其细胞形态、免疫表型、纯度及增殖能力，从而建立稳定的MSCs体外分离培养体系。方法将剔除动静脉及内膜的新鲜人脐带组织剪切成1 mm3小块，用含10％胎牛血清的DM EM／F12培养，得到贴壁细胞。观察贴壁细胞形态，利用CCK‐8试剂盒测定生长曲线，流式细胞术研究特殊细胞表面抗原CD29、CD73、CD90、CD105、CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA‐DR表达，并检测细胞周期。结果体外培养7～10 d后，可见细胞从组织块中游出；细胞主要呈纺锤体样、成纤维细胞样形态；生长曲线显示其增殖能力强；特殊表面抗原 CD29、CD73、CD90、CD105表达强阳性，造血性抗原标志CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA‐DR表达均呈阴性，流式细胞仪周期检测结果显示G0／G1期细胞超过80％。结论利用组织块法可有效获得人脐带 M SCs ，具有高纯度、低成本优点，并在体外较易培养、扩增。