Axin基因对人肾母细胞瘤细胞生物学特性的影响

目的:研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据.方法:采用基因工程的方法构建含Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,稳定转染G401细胞,建立高表达的G401细胞系.用MTT实验、克隆形成能力实验、侵袭能力实验三种方法检测Axin基因对G401细胞生物学特性的影响.结果:重组载体pIRES2-EGFP-Axin经PCR和双酶切鉴定结果显示:在约2500 bp大小处出现一条特异性条带,转染G401细胞后,经Western blotting结果显示:Axin蛋白在G401细胞中成功表达,同时,转染了pIRES2-EGFP-Axin质粒的G401细胞生长速度显著减慢(P＜0.05);G401细胞的克隆形成能力和侵袭力均显著降低(P＜0.05).结论:我们成功构建了重组真核表达载体PIRES2-EGRP-Axin,且通过Western blotting检测筛选获得稳定转染的G401细胞系,最后Axin体外实验对G401细胞生物学特性影响表明:Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系.