纳洛酮对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬的影响

目的 探讨纳洛酮对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬的影响.方法 将108只健康雄性清洁级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH组、纳洛酮组,每组36只.假手术组只进行造模手术不刺破血管,SAH组利用颈内动脉穿刺法制成大鼠SAH动物模型,纳洛酮组在造模成功后立即给予纳洛酮(1 mg∕kg体质量)腹腔注射,每12小时注射1次,用药至处死的各时相点.假手术组和SAH组采用同样方法注射同等体积的0.9％氯化钠溶液.每组又按6 h、24 h、72 h时间点分为3个亚组(每个亚组12只SD大鼠).穿梭箱实验观察三组大鼠的行为学变化;苏木素-伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化;免疫组织化学检测自噬特异性标志物Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)在大鼠海马区神经细胞的表达.结果 与假手术组相比,SAH组6 h、24 h、72 h各时间点逃避反应次数减少[(24.83±3.24)次比(14.41±1.98)次,(25.33±2.64)次比(16.25±2.18)次,(25.16±2.82)次比(18.33±2.57)次](P<0.05),逃避反应时间增加[(3.54±0.99)s比(9.09±1.38)s,(3.55±0.84)s比(8.73±1.13)s,(3.54±0.83)s比(8.00±1.04)s](P<0.05),海马区正常神经细胞数量减少[(122.67±5.55)个比(84.25±12.63)个,(122.25±5.50)个比(75.58±11.11)个,(121.58±5.68)个比(67.75±10.55)个](P<0.05),表达Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高[(20.50±3.45)个比(31.41±4.96)个,(20.33±2.77)个比(47.67±7.35)个,(20.50±3.59)个比(43.17±6.46)个;(17.08±3.00)个比(27.42±3.40)个,(17.50±2.31)个比(39.83±4.67)个,(17.41±2.57)个比(31.50±4.06)个](P<0.05).与SAH组比较,纳洛酮组各时间点逃避反应次数增多[(14.41±1.98)次比(16.50±1.93)次,(16.25±2.18)次比(19.25±2.30)次,(18.33±2.57)次比(22.50±2.20)次](P<0.05),逃避反应时间减少[(9.09±1.38)s比(8.05±1.24)s,(8.73±1.13)s比(6.56±1.09)s,(8.00±1.04)s比(5.36±0.97)s](P<0.05),海马区正常神经细胞数量增多[(84.25±12.63)个比(94.75±11.06)个,(75.58±11.11)个比(84.50±9.21)个,(67.75±10.55)个比(77.33±9.88)个](P<0.05),表达Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高[(31.41±4.96)个比(36.17±4.06)个,(47.67±7.35)个比(57.58±6.68)个,(43.17±6.46)个比(52.75±7.35)个;(27.42±3.40)个比(30.92±4.19)个,(39.83±4.67)个比(48.33±5.66)个,(31.50±4.06)个比(38.58±5.40)个](P<0.05).结论 纳洛酮的干预可适度激活SAH大鼠海马区神经细胞自噬的表达,并具有脑保护作用.