组蛋白H3Ser10磷酸化对猪卵母细胞减数分裂的影响

目的 组蛋白磷酸化修饰在卵母细胞减数分裂过程中作用机制的研究较少.文中旨在探讨猪卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及对卵母细胞减数分裂过程的调控.方法 首先采用免疫组化法鉴定组蛋白H3Ser10(H 3S10)磷酸化在猪卵母细胞减数分裂过程的表达情况,随后体外成熟猪卵母细胞,将卵丘卵母细胞复合体(COCs)分为4个组,一组正常培养作为对照组,另外3组分别添加5、10、30 μmol/L ZM447439的成熟液,体外培养27 h,分别为5、10、30 μmol/L ZM447439处理组.统计卵母细胞在减数分裂各个时期所占的比例,并进一步检测猪卵母细胞组蛋白H3S10磷酸化的表达模式及蛋白激酶Aurora B基因表达的情况.结果 与GVBD期组蛋白H3S10磷酸化水平比较,MI期和AI期明显升高(P<0.05),AI期较MⅡ期明显升高(P<0.05).与对照组相比,10、30 μmol/L ZM447439 处理组 GVBD 期卵母细胞比例[(32.14 ± 0.51)％、(95.34±0.59)％]较对照组[(2.56±0.03)％]增加(P<0.05),MI[(66.88±0.13)％、(4.66±0.04)％]较对照组[(87.42±0.14)％]明显下降(P<0.05)、AI期[(1.01±0.03)％、(0.00±0.00)％]较对照组[(10.02±0.21)％]明显下降(P<0.05).与对照组卵母细胞发生H3S10去磷酸化修饰比例(0)比较,10μmol/L 、30μmol/L ZM447439处理组[(35.2±0.39)％、(95.4±0.65)％]明显升高(P<0.05).与对照组相比,10、30μmol/L ZM447439处理组Aurora B基因的相对表达量显著降低(P<0.05).结论 组蛋白H3S10磷酸化修饰在哺乳动物卵母细胞成熟过程起着一定作用.Aurora B激酶抑制剂ZM447439处理引起组蛋白H3S10磷酸化水平及Aurora-B激酶的表达降低导致卵母细胞成熟障碍.