维生素D缺乏对小鼠心肌氧化应激水平的影响及机制研究

目的：既往研究结果显示维生素D缺乏与心室重构的发生密切相关，但具体机制尚未明确。氧化应激增加在心室重构发生与进展过程中发挥重要的作用，文中拟探讨维生素D缺乏对小鼠心肌氧化应激水平的影响及可能相关的信号通路。方法实验采用3周龄的C57小鼠，随机数字表法分成3组：维生素D缺乏组（维生素D缺乏饲料喂养10周），维生素D充足组（维生素D充足饲料喂养10周）及维生素D缺乏后补充组（维生素D缺乏饲料喂养10周后，转为维生素D充足饲料喂养＋骨化三醇治疗10周）。建模成功后，检测小鼠血液中25羟维生素D3水平及相关生化指标，心脏超声检查小鼠心脏腔室内径，8?OHDG染色测定小鼠心肌阳性细胞数，分别提取心肌线粒体蛋白、细胞核蛋白及总蛋白， Western blot 检查TXNIP、ASK?1、P?ASK?1、细胞色素C等蛋白表达量。结果心脏超声结果显示维生素D充足组小鼠与维生素D缺乏组小鼠相比较，心肌的左室舒张末期直径及左室质量指数均显著增高[（3．820±0．125）mm vs （3．748±0．092）mm，（119．30±8．54） vs （97．60±3．65），P＜0．05）。在对小鼠心肌切片进行8?OHDG染色后发现，维生素D充足组小鼠心肌中8?OHDG染色阳性的心肌细胞数（65．4±2．3）显著高于维生素D缺乏组（21．8±1．6），而补充骨化三醇后，可使8?OHDG染色阳性的心肌细胞数明显回落（36．4±1．5）。 Western blot检查结果提示，维生素D充足组小鼠心肌中TXNIP蛋白的表达显著上调，并伴随有P?ASK1／ASK?1的比值增加，Cyt C的释放及Cleaved caspase3的增加。结论维生素D缺乏可以引起心肌的氧化应激损伤，而损伤发生的机制可能与TXNIP蛋白表达的上调及ASK?1相关的细胞凋亡通路的激活有关。