小干扰RNA沉默白血病抑制因子基因对整合素ανβ3表达的影响

目的 白血病抑制因子(leukemia inhibitor factor,LIF)及整合素ανβ3 被认为是子宫内膜容受性的标记分子.探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对LIF的抑制效应及该效应对整合素ανβ3表达的影响.方法 化学合成3条LIF siRNA(LIFsiRNA-1、LIFsiRNA-2和LIFsiRNA-3),用脂质体法转染到小鼠子宫内膜细胞中,实时荧光定量PCR筛选出最佳干扰片段和最优转染浓度,RT-PCR检测整合素ανβ3 mRNA的表达水平,ELISA法检测细胞培养液中LIF蛋白,Western blot检测整合素ανβ3蛋白,从蛋白水平进行相关性分析.结果 siRNA转染后,LIFsiRNA-1 mRNA表达下调最明显(0.26±0.09),差异有统计学意义(P<0.01),且在一定范围内呈剂量依赖性,选择最优转染浓度70nmol/mL,整合素ανβ3 mRNA表达明显下降(0.53±0.23),差异有统计学意义(P<0.01);LIF蛋白[(2.47±0.03)ng/mL]及整合素ανβ3蛋白[(0.16±0.08)ng/mL]表达较对照组显著下调,差异有统计学意义(P<0.01).结论 LIFsiRNA-1可很好地抑制LIF的表达,而LIF的沉默表达能有效抑制整合素ανβ3的表达,LIF和整合素ανβ3具有显著正相关性(P<0.01).