MicroRNA-145-3p在先天性巨结肠中的作用及机制研究

目的 探讨microRNA-145-3p(miR-145-3p)在先天性巨结肠(HD)中的表达及其发挥作用的可能分子机制.方法 选取2013年2月—2018年6月南方医科大学珠江医院40例HD病变段肠管(HD病变肠管组)及40例正常肠管(正常肠管组)组织标本.采用qRT-PCR检测组织标本miR-145-3p相对表达量.过表达细胞miR-145-3p后,CCK-8法检测细胞的增殖情况;Transwell检测细胞迁移情况;双荧光素酶报告基因实验、Western blotting及免疫组织化学染色明确miR-145-3p对靶基因GDNF的影响.结果 HD病变肠管组miR-145-3p相对表达量高于正常肠管组(P<0.05).过表达细胞miR-145-3p后,细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞迁移能力降低(P<0.05);靶基因预测软件筛选出GDNF是miR-145-3p的潜在靶点;双荧光素酶报告基因实验证实,miR-145-3p可以与GDNF的3'-UTR结合(P<0.05);Western blotting检测证实,miR-145-3p可使SH-SY5Y细胞的GDNF蛋白相对表达量降低(P<0.05);而免疫组织化学染色证实,GDNF在miR-145-3p高表达的HD组织标本中存在高频低表达.结论 miR-145-3p可以抑制神经母细胞的增殖及迁移,是一个重要的HD分子标志物,其作用机制可能与抑制GDNF蛋白表达有关.