双色上转换纳米荧光探针在套细胞淋巴瘤细胞靶向成像中的应用

目的 构建上转换纳米靶向探针,并探究其在特异性标记套细胞淋巴瘤细胞株中的应用价值,为体内套细胞淋巴瘤的靶向诊断提供理论依据和指导.方法 采用H2O2对NaYF4:Er3+和NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子表面进行氧化处理,使该粒子由最初的疏水性转变为亲水性;在NHS、EDC的作用下,亲水性的NaYF4:Er3+上转换纳米粒子与CD20单克隆抗体共价结合,NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子与CD5单克隆抗体共价结合;CD20抗体-NaYF4:Er3+纳米粒子轭合物和CD5抗体-NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子轭合物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;CD20抗体-NaYF4:Er3+纳米粒子轭合物和NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;NaYF4:Er3+纳米粒子和CD5抗体-NaYF4:Yb3+,Tm3+纳米粒子轭合物的混合悬液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;未偶联有任何抗体的NaYF4:Er3+和NaYF4:Yb3+,Tm3+上转换纳米粒子的混合液与套细胞淋巴瘤细胞株室温下孵育2 h;使用配备有980 nm近红外激光的尼康Eclipse Ti-S倒置荧光显微镜对各组细胞进行上转换成像,观察细胞表面上转换荧光的强度.结果 实验组细胞表面释放出蓝、绿双色的上转换纳米荧光,但通过观察3组对照实验,细胞表面却仅分别释放出单一的绿色荧光、蓝色荧光以及未见任何荧光.结论 上转换纳米粒子与CD20或CD5抗体成功共价偶联,可以对套细胞淋巴瘤细胞株进行特异性标记、成像.