豚鼠脑基底动脉平滑肌细胞的原代培养及鉴定

目的 本研究联合使用直接贴壁法和酶消化法培养细胞,从豚鼠脑基底动脉中提取平滑肌细胞,为相关实验研究提供材料.方法 从豚鼠颅内分离出脑基底动脉,用0.125％胰蛋白酶进行消化并将组织块贴壁,细胞用含20％胎牛血清的DMEM/F-12培养基进行培养.采用自然纯化法,并根据不同细胞贴壁能力的差异性对细胞进行纯化.通过形态学观察、免疫荧光、免疫组织化学法及Western blot检测对细胞进行鉴定.结果 85％组织块存活,第4代平滑肌细胞纯度达95％.镜下可见细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫荧光、免疫组织化学法及Western blot检测显示,平滑肌细胞特异性的肌动蛋白呈阳性表达.结论 通过本实验可以得到大量高纯度的豚鼠脑基底动脉平滑肌细胞,有望为颅内动脉粥样硬化等病理生理变化的体外研究及脑血管平滑肌药物评价提供一个理想的实验材料.