长链非编码RNA HOTAIR对胃肠间质瘤细胞化疗敏感性的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)HOTAIR对胃肠间质瘤细胞伊马替尼化疗敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法 首先在胃肠间质瘤组织中检测HOTAIR的表达水平.选择胃肠间质瘤细胞GIST-T1为研究对象,si干扰HOTAIR后,采用dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)和半抑制浓度(IC50)法检测GIST-T1对伊马替尼化疗敏感性的变化.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法、RNAhybird软件分析和荧光素酶报告法,筛选并验证与HOTAIR存在内源性竞争关系的miRNAs.最后将miRNA与HOTAIR共转染,观察HOTAIR与miRNA的竞争性结合能否改变GIST-T1细胞对伊马替尼的化疗敏感性.结果 HOTAIR在胃肠间质瘤组织中表达含量高于正常组织(P<0.05).伊马替尼药物作用下,si-HOTAIR组细胞IC50低于si-NC组(P<0.05);TUNEL阳性细胞比例高于si-NC组(P<0.05);差异有统计学意义.qRT-PCR结果显示,si-HOTAIR组细胞miRNA-21表达水平高于si-NC组(P<0.05);RNA hybird分析及荧光素酶验证结果显示HOTAIR与miR-21核心序列区存在碱基互补.将miRNA-21与HOTAIR共转染GIST-T1细胞后,与miRNA-21+HOTAIR-突变型组比较,miRNA-21+HOTAIR-野生型组细胞IC50增高(P<0.05);TUNEL阳性细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 长链非编码RNA HOTAIR可通过内源性竞争结合miRNA-21,降低胃肠间质瘤细胞对伊马替尼的化疗敏感性.