MicroRNA-196a对食管癌预后的评估价值及其生物学行为的调控机制

目的 探讨microRNA-196a(miR-196a)对食管癌预后的评估价值及其生物学行为的调控机制.方法 收集120例行食管癌根治性手术切除的食管癌组织及癌旁组织,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织miR-196a表达水平,分析miR-196a表达与食管癌患者临床资料的关系.对食管癌患者进行随访,记录患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS);以OS和DFS作为评价指标,采用单变量和多变量Cox比例风险模型评价患者预后的影响因素.分别采用miR-196a mimic、NC-mimic、miR-196a inhibitor、NC-inhibitor转染食管癌TE1细胞,MTT实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞ANXA1、NTN4、HMGA2、HOXB8蛋白表达.结果 miR-196a在食管癌组织中表达水平高于癌旁组织(P＜0.05);在TE1细胞中,miR-196a mimic组miR-196a表达水平高于NC-mimic 组,miR-196a inhibitor组miR-196a表达水平低于NC-inhibitor组(P＜0.05),证实细胞转染实验成功.将食管癌患者按照miR-196a表达分为miR-196a高表达组51例和低表达组69例,miR-196a表达与年龄、性别、分化程度、N分期、肿瘤位置等无关(P＞0.05),随着T分期、TNM分期和肿瘤直径增加,miR-196a高表达率升高(P＜0.05).生存分析显示,miR-196a高表达患者总生存期(P=0.015)和无病生存期(P=0.017)低于miR-196a低表达者;单因素和多因素分析显示,T分期、miR-196a表达是影响患者总生存期和无病生存期的的独立危险因素(均P ＜0.05).MTT实验结果显示,第48～120 h,miR-196a mimic组吸光度值高于NC-mimic组,miR-196a inhibitor组吸光度值低于NC-inhibitor组(P＜0.05);Transwell小室实验显示,miR-196a mimic组穿膜细胞数量高于NC-mimic组,miR-196a inhibitor组穿膜细胞数量低于NC-inhibitor 组(P＜0.05);细胞划痕实验显示,miR-196a mimic组细胞迁移距离高于NC-miric组,miR-196a inhibitor 组细胞迁移距离低于NC-inhibitor组(P＜0.05).Westem blot实验结果显示,miR-196a mimic组、NC-mimic 组、miR-196a inhibitor组、NC-inhibitor组HMGA2、HOXB8蛋白表达比较差异均无统计学意义(P＞0.05),miR-196a mimic组ANXA1、NTN4蛋白表达低于NC-mimic组,miR-196a inhibitor组ANXA1、NTN4蛋白表达高于NC-inhibitor组(P＜0.05).结论 miR-196a能够作为食管癌预后的预测指标之一;miR-196a可能通过抑制ANXA1、NTN4基因的表达参与调控食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学行为.