二氢杨梅素调控自噬抑制氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞损伤的研究

目的 观察二氢杨梅素(DMY)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨自噬在其中的作用.方法 DMY(0.01、0.10、1.00和10.00μmol/L)预处理HUVECs 2 h,用100.0 mg/L ox-LDL继续培养细胞24 h.以辛伐他汀作为阳性对照组.采用噻唑蓝法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞核形态,透射电镜观察自噬体,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表达,观察自噬抑制剂对DMY作用的影响.结果 与对照组比较,ox-LDL组细胞的存活率降低(<0.05),细胞核呈集中高强度蓝色荧光,固缩致密浓染或碎块状致密浓染,颜色发白,细胞核较小,形态不规则,自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).与ox-LDL组比较,0.1、1.0和10.0μmol/L DMY预处理组细胞存活率均升高;细胞核荧光强度降低,核固缩致密浓染和碎块状致密浓染减少,形态较规则;1.0μmol/L DMY预处理组的自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).自噬抑制剂3-MA部分抵消DMY抑制ox-LDL诱导的HUVECs存活率降低(<0.05).结论 DMY能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制与诱导自噬有关.