复氧前给予不同浓度乳化异氟醚的大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤情况观察

目的 观察复氧前给予不同浓度乳化异氟醚(EI)的大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤情况.方法 手术分离雄性SD大鼠心肌细胞并培养,将心肌细胞随机分为FAT组和不同浓度EI处理组(EI1组、EI2组、EI3组),采用混合气体培养法制备缺氧/复氧心肌细胞,其中FAT组复氧前加入脂肪乳(FAT)进行处理,EI1组、EI2组、EI3组复氧前分别加入0.84、1.68、2.52 mmol/L EI进行处理.收集各组心肌细胞,进行细胞线粒体损伤评分(Flameng评分),测定细胞内游离Ca2+荧光强度,观察细胞内NF-E2相关因子2(Nrf2)蛋白核转位荧光强度,采用RT-PCR法和Western blotting法分别检测各组细胞中Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、醌氧化还原酶1(NQO1)mRNA和蛋白.结果 不同浓度EI处理组细胞线粒体Flameng评分和细胞内游离Ca2+荧光强度均低于FAT组,且EI2组最低.EI1组、EI2组、EI3组、FAT组细胞内Nrf2蛋白核转位荧光强度分别为152.71±13.36、181.95±10.59、156.39±11.20、135.25±19.73,其中EI2组细胞内Nrf2核转位荧光强度与EI1组、EI3组、FAT组相比,P均<0.05.不同浓度EI处理组Nrf2、HO-1、SOD1、NQO1 mRNA和蛋白相对表达量均高于FAT组,且EI2组最高.结论 复氧前给予不同浓度EI处理对大鼠缺氧/复氧心肌细胞均可起到保护作用,1.68 mmol/L的EI保护作用最优;EI可能是通过激活Nrf2/ARE通路发挥保护作用.