人肝癌细胞株中PTPRD表达变化及其对HuH-7细胞增殖、迁移的影响和机制

目的 观察人肝癌细胞株HuH-7中蛋白酪氨酸磷酸酶D(PTPRD)的表达变化及其对细胞增殖和迁移的影响,并探讨相关机制.方法 采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法分别检测人正常肝细胞株LO2及肝癌细胞株HepG2、HuH-7中的PTPRD mRNA和蛋白.将HuH-7细胞分为PTPRD上调组和阴性对照组,分别转染PTPRD过表达腺病毒和阴性对照腺病毒.采用MTT实验检测两组HuH-7细胞的增殖能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Western blotting法检测两组细胞中的蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR).结果 HepG2细胞和HuH-7细胞中PTPRD mRNA及蛋白相对表达量均低于LO2细胞(P均<0.05).PTPRD上调组细胞贴壁24、48、72 h时细胞增殖能力低于阴性对照组.PTPRD上调组划痕48 h后细胞迁移率低于阴性对照组(P<0.01).PTPRD上调组细胞p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR均低于阴性对照组(P均<0.01).结论 HuH-7细胞中PTPRD呈低表达;PTPRD基因过表达后可抑制HuH-7细胞的增殖和迁移能力,其机制可能与抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路有关.