ENPP2对血管内皮细胞增殖和迁移的影响及机制

目的 探讨焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)对血管内皮细胞(HUVEC)增殖和迁移的影响及机制.方法 将HUVEC细胞随机分为Ad.ENPP2组、Ad.Null组,分别感染过表达病毒Ad.ENPP2和对照病毒Ad.Null,采用qRT-PCR法检测HUVEC细胞LPA受体(LPAR1～LPAR6)、ENPP2表达,CCK-8法检测HUVEC细胞的增殖能力,Transwell法检测HUVEC细胞的迁移能力,LPA试剂盒检测HUVEC细胞LPA水平,Western blotting法检测EN-PP2表达及AKT信号通路的磷酸化水平;之后将HUVEC细胞随机分为LPAR1拮抗剂Ki16198组和对照组,CCK-8法和Transwell法分别检测Ki16198干预前后HUVEC细胞增殖和迁移能力,Western blotting法检测Ki16198干预前后HUVEC细胞AKT信号通路的磷酸化水平.结果 Ad.ENPP2组ENPP2 mRNA、蛋白相对表达量分别为0.186±0.004、1.261±0.080,Ad.Null组分别为0.002±0.000、0.532±0.031,两组比较P<0.05;Ad.ENPP2组HUVEC细胞增殖倍数、迁移能力及HUVEC细胞上清中LPA水平均高于Ad.Null组(P均<0.05);HUVEC细胞中LPAR1～LPAR6的相对表达量分别为0.377±0.011、0.004±0.002、0.002±0.001、0.000±0.000、0.000±0.000、0.007±0.001,其中LPAR1表达最高;与Ad.Null组相比,Ad.ENPP2组AKT表达升高(P<0.05);Ki16198干预后HUVEC细胞的增殖倍数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),但HUVEC细胞的迁移能力明显降低(P<0.05);与对照组相比,Ki16198干预后HUVEC细胞AKT表达下降(P<0.05).结论 ENPP2可促进HUVEC细胞的增殖与迁移,其机制可能通过激活AKT信号通路实现.