环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制

目的 观察环状RNA (circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制.方法 将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA.两组转染24 h,分别检测其培养0～4d细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭及迁移能力.免疫共沉淀实验筛选与circRNA-1565结合的miRNA分别为miR-21和miR-153,采用双荧光素酶报告基因实验观察circRNA-1565对miR-21和miR-153的调控作用.将PC-3细胞分为si445组、si445+ miR-21 inhibitor组、si445+ miR-153 inhibitor组、阴性对照组,分别转染si445、si445+ miR-21 inhibitor、si445+ miR-153 inhibitor及阴性对照siRNA,并检测细胞侵袭、迁移能力.采用Western blotting法检测si445组、si445+ miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、蜗牛家族转录抑制子1(SNAIL1)蛋白表达.结果 观察组与对照组不同时间点细胞增殖OD值、克隆形成个数、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),观察组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均低于对照组(P均＜0.05).双荧光素酶报告基因结果显示,circRNA-1565可以分别与miR-21及miR-153直接结合.与阴性对照组比较,其余三组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均降低,且si445组、si445+ miR-21inhibitor组降低更明显(P均＜0.05).si445组、si445+ miR-21 inhibitor组进入下室的细胞个数、细胞移动距离比较P均＞0.05.si445组、si445+ miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞H3K蛋白相对表达量依次升高(P均＜0.05),三组细胞PTEN和SNAIL1蛋白相对表达量比较P均＞0.05.结论 circRNA-1565可促进前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移,其机制可能与竞争性结合miR-153并沉默其下游靶蛋白PI3K表达有关.