脱氢表雄酮对高脂诱导的人脐静脉内皮细胞MMP-2表达的影响及CYP19在其中的作用

目的 观察脱氢表雄酮(DHEA)对高脂诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,以及细胞色素P450芳香酶(CYP19)在此过程中的作用.方法 取健康新生儿脐带,分离并培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).将HUVEC分为4组:正常对照组予以DMEM/F12培养基,ox-LDL组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,DHEA组予以DMEM/F12培养基+1μmol/L DHEA,ox-LDL+DHEA组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.作用24 h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达.将HUVEC分为pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组、pcDNA3.1-GFP空质粒组,通过脂质体介导的方法分别转染pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒和pcDNA3.1-GFP空质粒.将pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组再分为3组:CYP19组予以无血清DMEM/F12培养基,CYP19+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,CYP19+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.将pcDNA3.1-GFP空质粒组再分为3组:空质粒组予以无血清DMEM/F12培养基;空质粒+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,空质粒+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.均培养24h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细胞MMP-2mRNA及蛋白表达.结果 ox-LDL组MMP-2 mRNA及蛋白表达较正常对照组升高,ox-LDL+DHEA组较ox-LDL组降低(P均<0.05).CYP19+ox-LDL+DHEA组MMP-2 mRNA及蛋白表达较空质粒+ox-LDL+DHEA组降低,CYP19+ox-LDL组较CYP19组升高,CYP19+ox-LDL+DHEA组较CYP19+ox-LDL组降低(P均<0.05).结论 DHEA能够抑制高脂诱导的MMP-2表达,过表达CYP19能够增强DHEA的这一作用.