LncRNACCAT1对结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制
Shandong Medical Journal(2018)
Abstract
目的 探讨长链非编码RNA CCAT1(LncRNA CCAT1)对体外培养结肠癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制.方法 体外培养结肠癌细胞系SW480及正常结肠上皮细胞系FHC,采用qRT-PCR法检测LncRNA CCAT1表达,结果显示结肠癌细胞中LncRNA CCAT1高表达.将对数生长期的SW480细胞随机分为CCAT1-siRNA组、Control-siRNA组和空白对照组,前两组分别转染LncRNA CCAT1-siRNA(抑制LncRNA CCAT1表达)及随机对照序列LncRNA CCAT1-NC,空白对照组常规培养.转染处理24 h结束时,采用CCK-8法检测细胞增殖能力(OD450值),采用流式细胞术检测细胞凋亡能力,采用细胞划痕试验检测细胞迁移能力,采用Western blotting法检测E钙黏蛋白( E-cadherin)、基质金属蛋白酶9 ( MMP-9)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 ( Caspase-3)表达.结果 转染24 h结束时,三组继续培养48、72、96 h时CCAT1-siRNA组OD450值均低于Control-siRNA组及空白对照组(P均<0.05). CCAT1-siRNA组细胞凋亡率为(14.3 ±1.5)%,Control-siRNA组为(3.5 ±0.8)%,组间比较P<0.01. CCAT1-siRNA 组细胞划痕愈合率为(31.6 ±2.5)%,Control-siRNA 组为(53.4 ±4.3)%,组间比较P<0.01. CCAT1-siRNA组Caspase-3 相对表达量高于 Control-siRNA 组,E-cadherin、MMP-9 相对表达量均低于Control-siRNA组(P均<0.01).结论 下调结肠癌细胞中LncRNA CCAT1表达可抑制细胞增殖、迁移,并诱导凋亡,其机制可能与下调MMP-9、E-cadherrin表达及上调Caspase-3表达有关.
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