miR-29 a过表达对胶质瘤细胞迁移的作用及机制

目的 探讨miR-29a对胶质瘤细胞迁移的作用及机制.方法 用RT-PCR法检测人正常神经胶质细胞(OLN93)及胶质瘤细胞(U87、A172、U251、SHG44)中转录因子(Sp1)mRNA和miR-29a表达,用Western blotting法检测细胞中Sp1蛋白表达.将U87、A172细胞均随机分为miR-29a过表达组、阴性对照组,分别转染外源性miR-29a mimics、miR-NC mimics;分别用实时定量PCR技术、Western blotting法检测细胞中Sp1 mRNA、蛋白表达.另取部分U87、A172细胞,均随机分为si-Sp1-1组、si-Sp1-2组、阴性对照组,分别转染si-Sp1-1、si-Sp1-2、si-NC.用双荧光实验检测miR-29a对Sp1的直接靶向作用.用Transwell实验检测细胞迁移能力.结果 U87、A172、U251、SHG44细胞中Sp1 mRNA及蛋白相对表达量均高于OLN93细胞(P均<0.05),miR-29a相对表达量均低于OLN93细胞(P均<0.05).U87、A172细胞miR-29a过表达组中Sp1 mRNA、蛋白相对表达量较阴性对照组低(P均<0.05).双荧光实验结果显示miR-29a能直接作用于Sp13′-UTR区,并能下调Sp1的表达.U87、A172细胞miR-29a过表达组中迁移细胞数较阴性对照组少(P均<0.05).U87、A172细胞si-Sp1-1组、si-Sp1-2组中迁移细胞数较阴性对照组少(P均<0.05).结论 miR-29a过表达可抑制胶质瘤细胞的迁移,该作用可能与下调Sp1的表达有关.