APCDD1对骨髓基质干细胞成脂分化及脂质合成的影响

目的 探讨结肠腺瘤样息肉下调蛋白1(APCDD1)对骨髓基质干细胞(BMSC)成脂分化及脂质合成的影响.方法 将培养好的BMSC系ST2细胞随机分为空白对照组、实验组与对照组.采用无缝克隆法构建APCDD1过表达质粒.实验组、对照组分别转染APCDD1过表达质粒、pcDNA3.1质粒,空白对照组常规培养.采用传统鸡尾酒法诱导ST2细胞向脂肪细胞分化成熟.用qRT-PCR法检测在ST2细胞成脂分化过程中APCDD1 mRNA表达.用油红O染色法检测细胞内脂滴生成情况,测定OD520值;分别用qRT-PCR及Western blotting技术检测ST2细胞内相关基因、蛋白表达.结果 成脂诱导1～5 d,APCDD1 mRNA相对表达量升高,均高于0 d(P均<0.05),成脂诱导2 d时APCDD1 mRNA相对表达量最高(P均<0.05).转染后,实验组APCDD1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05);ST2细胞形成的脂滴数量增多,实验组OD520值高于对照组(P<0.05).与对照组比较,实验组成脂分化特异性因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ、CCAAT增强子结合蛋白α、脂肪酸结合蛋白4 mRNA及蛋白相对表达量高(P均<0.05),脂肪合成代谢关键因子脂肪酸合酶、脂滴包被蛋白、乙酰辅酶A羧化酶1 mRNA及蛋白相对表达量高(P均<0.05).结论 APCDD1可促进BMSC的成脂分化和脂质合成.