裂果薯总皂苷对人肝癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响及对正常肝细胞的毒性作用

目的 观察裂果薯总皂苷(SFSP)对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、迁移、凋亡的影响及对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用.方法 取对数生长期的SMMC-7721细胞,分为给药组和对照组(不加SFSP),给药组分别加入0.625、1.25、2.5、5 μg/mL的SFSP培养24 h,采用MTT法观察并计算细胞增殖抑制率和IC50;分别以0、2、4、6 μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞,分别于培养24、48 h采用划痕实验观察细胞迁移能力变化;分别以0、2、4、6 μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞,培养24 h后采用吖啶橙/溴乙双荧光染色法观察SMMC-7721细胞凋亡情况,免疫荧光法观察细胞形态.取对数生长期的HL-7702细胞,分别加入0、2.5、12.5、25、50、100 μg/mL的SFSP,测算细胞增殖抑制率及IC50.结果 0.625、1.25、2.5、5 μg/mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞24、48、72 h后,细胞增殖受到不同程度的抑制,SFSP对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用呈现时间与剂量依赖性(P均<0.05);SFSP在24、48、72 h时的IC50值分别为3.75、1.56、0.95 μg/mL.0、2、4、6 μg/ mL的SFSP作用于SMMC-7721细胞后,细胞划痕愈合率逐渐减小,凋亡细胞逐渐增多(P均<0.05).SFSP作用后,SMMC-7721细胞出现皱缩,呈圆形或纺锤形,微管蛋白β荧光强度降低并高度聚集,观察到大量阻滞于分裂周期中的细胞.0、2.5、12.5、25、50、100 μg/mL的SFSP作用于HL-7702细胞后,细胞增殖受到不同程度的抑制,SFSP作用24 h的IC50为47.6 μg/mL,低于作用于SMMC-7721细胞24 h时的IC50(3.75 μg/mL).结论 SFSP可抑制SMMC-7721细胞增殖与迁移,诱导其凋亡,阻滞其细胞周期,且对正常肝细胞毒性作用较小.