沉默MACC1基因对人卵巢癌耐药细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 观察应用基因沉默技术抑制人卵巢癌耐药细胞结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达后,细胞增殖、凋亡和侵袭能力的变化及其分子机制.方法 将人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP分成空质粒组和转染组,分别转染空质粒p-super-EGFP、重组质粒p-super-EGFP-MACC1 shRNA,另取未经处理的SKOV-3/DDP细胞作为空白对照组.采用RT-PCR方法检测各组MACC1 mRNA表达,Western blotting法检测MACC1蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,体外黏附试验检测细胞体外黏附力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blotting法测定C-met、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达.结果 与空白对照组和空质粒组比较,转染组MACC1 mRNA和蛋白表达减少,细胞48、72 h增殖能力减弱,细胞凋亡率增加,体外黏附和侵袭能力减弱,C-met、p-ERK1/2蛋白表达增加(P均<0.05),而空白对照组和空质粒组各指标差异无统计学意义(P均>0.05).结论 MACC1基因表达抑制后,SKOV-3/DDP的增殖、黏附和侵袭能力减弱,细胞凋亡增加,这可能与HGF/C-met和ERK通路受抑制有关.