miRNA-30a-5p过表达对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡的影响

目的 观察miRNA-30a-5p过表达对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将肾癌细胞株786-0分为模拟物组、抑制物组、未转染组,模拟物组转染miRNA-30a-5p模拟物,抑制物组转染miRNA-30a-5p抑制物,未转染组为正常肾癌细胞株786-0.采用实时荧光定量PCR法检测模拟物组、抑制物组、未转染组肾癌细胞株786-0及正常人肾小管上皮细胞HK-2(正常组)miRNA-30a-5p,CCK-8法观察各组培养24、48、72 h后的细胞增殖能力,流式细胞术观察前三组细胞凋亡情况,Western blotting法检测前三组细胞中异黏蛋白(MTDH)表达.结果 正常组、模拟物组、抑制物组、未转染组细胞miRNA-30a-5p mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、1.32±0.05、0.32±0.05、0.52±0.06,正常组、模拟物组、抑制物组与未转染组相比,P均<0.01.正常组在培养24、48、72 h后的吸光度值分别为0.26±0.02、0.44±0.03、0.73±0.06,模拟物组分别为0.33±0.04、0.50±0.05、0.88±0.05,抑制物组分别为0.86±0.01、1.88±0.12、2.48±0.15,未转染组分别为0.62±0.01、1.63±0.02、2.34±0.23,正常组、模拟物组各时点分别与抑制物组、未转染组相比,P均<0.01.模拟物组、抑制物组、未转染组细胞凋亡率分别为11.91%±0.45%、5.23%±0.38%、6.77%±0.52%,模拟物组与抑制物组、未转染组相比,P均<0.01.模拟物组、抑制物组、未转染组MTDH蛋白的相对表达量分别为1.14±0.08、6.31±0.24、5.56±0.06,模拟物组与抑制物组、未转染组相比,P均<0.01.结论 miRNA-30a-5p过表达可明显抑制肾癌细胞株786-0的增殖、促进细胞凋亡,其可能是通过调控MTDH蛋白表达实现的.