丝素蛋白三维支架与骨髓间充质干细胞的生物相容性观察

目的：制备丝素蛋白三维支架，并与大鼠骨髓间充质干细胞（ MSCs ）复合培养，观察二者的生物相容性。方法将家用蚕丝反复脱胶，计算脱胶率；将脱胶的蚕丝溶于LiBr溶液中获得丝素蛋白溶液，置于真空冷冻干燥机中作用24 h，获得成型的丝素蛋白三维支架。液体置换法计算支架孔隙率；将该支架与MSCs复合培养，记录支架降解1～8周降解液的pH值变化，MTT法检测支架的细胞毒性（以吸光度值表示），扫描电镜下观察支架结构及MSCs生长情况。结果平均脱胶率为20．72％，平均支架孔隙率为65．25％。复合培养1～8周降解液pH值分别为6．98、6．93、6．90、6．83、6．72、6．75、6．78、6．76。两组吸光度值比较，P均＞0．05。扫描电镜下观察到该支架具有三维空间结构，孔隙大小分布较均匀；复合物中可见MSCs在支架上生长良好，部分细胞嵌入支架孔隙中，与支架黏附良好；细胞外基质分泌量多，细胞与细胞间、细胞与支架间通过细胞外基质紧密相连。结论成功制备丝素蛋白三维支架，该支架对MSCs无毒性作用，具有良好的生物相容性，是一种理想的韧带组织工程学支架材料。