雷洛昔芬对镉染毒后肾小管上皮细胞存活情况及1-α羟化酶表达的影响

目的 观察应用雷洛昔芬对镉染毒的肾小管上皮细胞存活情况及1-α羟化酶表达的影响,探讨雷洛昔芬治疗镉中毒导致肾毒性的机制.方法 分离纯化SD大鼠肾小管上皮细胞原代细胞.分别用浓度为2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L的氯化镉对肾小管上皮细胞染毒24 h,采用MTT法测算肾小管上皮细胞的相对存活率.选取20.0μmol/L的氯化镉剂量作用于肾小管上皮细胞,分别用0.05、0.10、0.50、1.00 μmol/L的雷洛昔芬干预24h,采用MTT法测算肾小管上皮细胞的相对存活率.将肾小管上皮细胞分为空白对照组、氯化镉组、雷洛昔芬组,空白对照组培养于DMEM培养基,氯化镉组以20.0 μmol/L的氯化镉染毒肾小管上皮细胞,雷洛昔芬组以20.0μmol/L的氯化镉染毒后给予雷洛昔芬0.10 μmol/L干预,均干预24 h,在显微镜下观察细胞形态,采用RT-PCR法检测肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA表达.结果 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L的氯化镉干预24 h后,肾小管上皮细胞的相对存活率均降低(P均＜0.01),且氯化镉浓度较高时细胞相对存活率较低.对镉染毒后的肾小管上皮细胞以0.05、0.10、0.50、1.00 μmol/L的雷洛昔芬干预24 h后,肾小管上皮细胞的相对存活率均高于镉染毒细胞(P均＜0.01).空白对照组肾小管上皮细胞形态正常,氯化镉组肾小管上皮细胞形态异常、大量细胞死亡,雷洛昔芬组细胞形态异常较氯化镉组明显减轻.氯化镉组肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA相对表达量低于空白对照组,雷洛昔芬组1-α羟化酶mRNA相对表达量高于氯化镉组(P均＜0.05).结论 雷洛昔芬对氯化镉染毒的肾小管上皮细胞具有保护作用,可上调镉染毒后肾小管上皮细胞1-α羟化酶mRNA的表达.