GPI-B7-1锚定肾癌细胞膜对细胞毒性T 淋巴细胞杀伤自身肿瘤的促进作用

目的：探讨糖基磷脂酰肌醇（ GPI）-B7-1锚定肾细胞癌（ RCC）细胞膜能否提高细胞毒性T淋巴细胞（ CTL）对自身肿瘤的杀伤能力。方法取出本实验室冻存于液氮罐中的经转基因高表达GPI-B7-1的CHO／DH-FR－细胞，再从该CHO／DHFR－细胞上洗脱目的蛋白GPI-B7-1，并进行分离纯化，Western blotting法检测活性。建立肾癌细胞系CG-6327。将CTL分别与GPI-B7-1-CG-6327细胞膜、CG-6327细胞膜、GPI-B7-1-CHO／DHFR－细胞膜作用24 h，此时得到被三种不同物质活化的CTL细胞，再设单纯体外培养的CTL作为对照，分别将上述四种CTL细胞加入到已接种有CG-6327细胞的96孔板中，进行24 h杀伤试验， MTT法测定CTL的杀伤活性。结果经GPI-B7-1-CG-6327细胞膜活化的CTL细胞杀伤活性（A值）与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05），其他几种物质活化的CTL细胞杀伤活性与对照组比较，P均＞0．05。结论通过基因重组方法表达的GPI-B7-1锚定蛋白可被转移并锚定在RCC细胞膜表面提供第二刺激信号， GPI-B7-1锚定后的具有双刺激信号的RCC细胞膜对于CTL的活化有增强作用。