转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化

wf(2016)

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摘要
目的:观察转染尾型同源盒基因(CDX2)siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化。方法将对数生长期的人慢性粒细胞白血病K562细胞,分为实验组和对照组,实验组包括A、B、C组,A组不转染,B、C组分别转染CDX2-siRNA和阴性对照序列(CDX2-siRNA-NC),然后实验组均加入60μmol/L的人参皂苷Rh2培养。对照组K562细胞常规培养。培养6、12、24、36、48 h采用MTT法测算各实验组细胞增殖抑制率;培养48 h采用Annexin Ⅴ-FITC/PI 双染法和流式细胞术测算各实验组细胞凋亡率。培养48 h时采用实时荧光定量PCR法检测各实验组细胞CDX2、Ph标记染色体或(和)BCR/ABL基因重排(BCR-ABL融合基因)mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞CDX2、BCR-ABL融合蛋白。结果培养6、12、24、36、48 h时B组细胞增殖抑制率均高于A、C 组(P均<0.05)。培养48 h时A、B、C 组的细胞凋亡率分别为26.50%±0.72%、73.20%±1.06%、32.00%±1.34%,B组细胞凋亡率均高于A、C组。培养48 h时,B组细胞CDX2、BCR-ABL融合基因mRNA及蛋白相对表达量均低于A、C组,P均<0.05。结论转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率升高,这可能是转染CDX2-siRNA降低K562细胞CDX2表达,然后降低BCR-ABL融合基因表达导致的。
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