骨碎补总黄酮对废用性骨质疏松大鼠BMSCs 成脂分化的影响及机制探讨
Shandong Medical Journal(2015)
Abstract
目的:观察骨碎补总黄酮含药血清对废用性骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)成脂分化的影响,并探讨其可能机制。方法57只SD雌性大鼠均制备废用性骨质疏松模型,制模成功后将实验大鼠分为4组。A组12只,不加任何干预;B组15只,术后常规喂养4周,后以辛伐他汀灌胃6周制备含药血清;C组15只,术后常规喂养4周,后以低剂量骨碎补总黄酮灌胃6周制备含药血清(相当于临床剂量的5倍);D组15只,术后常规喂养4周,后以高剂量骨碎补总黄酮灌胃6周制备含药血清(相当于临床剂量的20倍)。大鼠用颈椎脱臼法处死,取原代BMSCs,并进行体外培养、传代和纯化,观察各组成脂油红染色情况,比较各组Wnt信号分子( Wnt3a)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)、过氧化物酶体增殖物激治受体(PPAR)γ2 mRNA和蛋白。结果 A、B、C、D组成脂油红染色OD值分别为0.216333±0.010、0.165667±0.012、0.152333±0.010、0.168667±0.008,A组分别与B、C、D组比较,P均<0.05。 A组Wnt3a、LRP6、PPARγ2 mRNA分别为1.00±0.23、1.00±0.13、1.00±0.15,B组分别为3.71±0.25、3.47±0.18、0.46±0.21,C组分别为3.38±0.21、2.83±0.45、0.42±0.34,D组分别为2.98±1.11、2.81±0.07、0.35±0.12,A组分别与B、C、D组比较,P均<0.05。 A、B、C、D组Wnt3a蛋白分别为0.49±0.14、0.72±0.11、0.75±0.10、0.78±0.15,A组分别与B、C、D组比较,P均<0.05;LRP6蛋白分别为0.62±0.19、0.95±0.16、1.07±0.23、1.12±0.25,A组分别与B、C、D组比较,P均<0.05;PPARγ2蛋白分别为0.30±0.04、0.27±0.06、0.48±0.08、0.45±0.09,A、B组分别与C、D组比较,P均<0.05。。结论骨碎补总黄酮可抑制废用性骨质疏松大鼠BMSCs成脂分化,其机制可能为上调Wnt3a、LRP6表达水平,并抑制PPARγ2表达。
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