熊果酸对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的 探讨熊果酸(UA)对博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的防治作用及潜在机制.方法 30只SD大鼠按照双盲法随机均分成空白对照组(Control)、肺纤维模型组(BLM)和熊果酸组(UA),每组10只.大鼠气管内滴注博莱霉素构建大鼠肺纤维化模型.熊果酸组于BLM滴注后第2天起按[40 mg/(kg·d)]的剂量灌胃熊果酸,模型组和对照组在相同时间灌胃生理盐水.28 d后处死大鼠收集肺脏和血清.HE和Masson染色观察测肺组织病理形态;碱水解法检测大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度;ELISA和RT-PCR检测血清和肺组织中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)表达水平;Western blotting检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、胶原酶Ⅰ(CollagenⅠ)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因88(MyD88)、p65和p-p65表达水平.结果 模型组大鼠的肺泡炎评分为(3.74±0.66)分,肺纤维化评分为(3.92±0.71)分,明显高于熊果酸组的(2.31±0.38)分和(2.12±0.47)分以及对照组的(1.18±0.43)分和(1.05±0.33)分,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠的羟脯氨酸的浓度为(1.98±0.24)mg/g,明显高于熊果酸组的(1.41±0.17)mg/g以及对照组的(0.84±0.12)mg/g,差异均具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠的肺组织TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA水平分别为(11.50±1.25)、(8.50±0.45)和(5.20±0.60),较熊果酸组的(5.50±0.55)、(4.50±0.20)和(2.50±0.35)以及对照组的(1.01±0.11)、(1.02±0.13)和(1.05±0.13)均明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠血清中的TNF-α、IL-6和IL-1β水平分别为(1150±340)pg/mL、(685±72)pg/mL和(835±165)pg/mL,明显高于熊果酸组的(620±130)pg/mL、(355±45)pg/mL和(565±85)pg/mL以及对照组的(125±25)pg/mL、(120±15)pg/mL和(122±13)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);此外,模型组大鼠肺组织TLR4、MyD88、α-SMA、Vimentin、CollageI和p-p65灰度比值分别为(0.79±0.14)、(0.68±0.12)、(0.75±0.13)、(0.51±0.09)、(0.52±0.13)和(0.47±0.08),明显高于熊果酸组的(0.48±0.11)、(0.53±0.09)、(0.38±0.08)、(0.27±0.05)、(0.31±0.109)和(0.15±0.04)以及对照组的(0.45±0.09)、(0.36±0.07)、(0.37±0.07)、(0.29±0.06)、(0.34±0.109)和(0.19±0.05),差异均有统计学意义(P<0.05);模型组、熊果酸组和对照组大鼠的p65灰度比值分别为(0.41±0.16)、(0.43±0.13)和(0.39±0.15),差异无统计学意义(P>0.05).结论 熊果酸对博莱霉素致大鼠肺纤维化有治疗作用,其作用机制与抑制TLR-4/NF-κB介导的炎症信号通路激活相关.