表没食子儿茶素没食子酸酯对肝细胞氧化损伤的初步研究

目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对正常人HL7702肝细胞氧化损伤的作用.方法 以正常人HL7702肝细胞为研究对象,用不同浓度EGCG(0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL)处理细胞1 h、12 h、24 h,均以0μg/mL EGCG浓度组为对照组.倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,DCFH-DΑ荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS),生化分析检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果 EGCG浓度在40μg/mL以下时,对肝细胞存活率下降无明显影响,差异均无统计学意义(P>0.05);且5μg/mL、20μg/mL EGCG处理24 h后的肝细胞存活率分别为(108.34±4.12)％、(109.59±3.14)％,与对照组的(100.00±3.40)％比较,细胞存活率明显提高,差异均有统计学意义(P<0.05);80μg/mL EGCG处理细胞1 h后,ROS为(5.36±0.68)％,与对照组的(3.88±0.10)％比较明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);80μg/mL EGCG处理细胞24 h,与对照组的细胞存活率[(100.00±3.40)％]、LDH[(168.89±4.90)U/L]、ROS[(3.54±0.68)％]比较,细胞存活率[(40.05±7.83)％]明显降低,LDH[(195.48±11.23)U/L]、ROS[(10.99±1.54)％]显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);160μg/mL EGCG作用肝细胞1 h,与对照组的细胞存活率[(100.00±2.23)％]、LDH[(163.89±5.37)U/L]、ROS[(3.88±0.10)％]比较,肝细胞存活率[(79.87±4.72)％]明显降低,LDH[(200.72±13.45)U/L]、ROS[(8.14±0.29)％]明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);160μg/mL EGCG作用肝细胞12 h、24 h,细胞存活率分别为(16.00±0.99)％、(11.11±0.41)％,LDH分别为(199.21±13.11)U/L、(435.71±25.84)U/L,与对照组的细胞存活率[(100.00±0.34)％、(100.00±3.40)％]和LDH[(169.56±3.55)U/L、(168.89±4.90)U/L]比较差异均有统计学意义(P<0.05),同时显微镜下可见大量细胞死亡.结论 低剂量EGCG(<40μg/mL)对正常人HL7702肝细胞无明显损伤作用,并具有一定的促增殖作用,高剂量下(>80μg/mL)可明显增加肝细胞氧化损伤,且随EGCG作用浓度、作用时间的增加损伤也增加.