微小RNA-186上调Dicer1抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的机制研究

China Medicine(2020)

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摘要
目的 探讨微小RNA-186(miR-186)通过调控Dicer1对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的影响及其作用机制.方法 收集2018年1月至2019年2月于山东省威海市中心医院经手术切除后病理证实为乳腺癌的组织标本及其对应的癌旁正常组织标本各40份,实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-186在乳腺癌组织及对应的癌旁正常组织标本、人乳腺癌细胞株MCF-7以及正常人乳腺上皮细胞MCF10A的表达情况;Transwell法检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7迁移能力的影响;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-186和Dicer1的靶向关系;蛋白质印迹法检测Dicer1在各细胞株中的表达.结果 乳腺癌组织中miR-186的表达水平显著低于癌旁正常组织[(0.38±0.11)比(0.98 ±0.24)] (P <0.05);miR-186在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A[(0.14±0.05)比(1.04±0.27)](P<0.05).过表达miR-186后,MCF-7-mimic-miR-186细胞穿过Matrigel基质胶的数量及覆盖划痕区域少于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P<0.05).经www.microRNA.org网站预测发现miR-186和Dicer1有互补结合序列,双荧光素酶报告实验证实二者的靶向结合关系.人乳腺癌细胞株MCF-7中Dicer1表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A,MCF-7-mimic-miR-186中Dicer1表达水平明显高于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P<0.05).结论 miR-186通过靶向正调控Dicer1的表达,抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭迁移能力.
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关键词
Breast cancer,MicroRNA-186,Dicer1,Invasion,Metastasis
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