幽门螺杆菌对不同类型胃癌细胞和正常胃上皮细胞凋亡和增殖的影响

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞和正常胃上皮细胞形态、细胞周期以及细胞凋亡与增殖的影响.方法 采用倒置显微镜观察人低分化胃腺癌细胞株MGC-803、人胃上皮细胞GES-1、人胃癌细胞株BGC-823、人胃腺癌细胞株SGC-7901与感染复数为100/1、200/1的Hp活菌悬液共同培养24、48 h后实验组和对照组(不加入Hp活菌悬液)的细胞形态改变;采用蛋白质印迹法检测加入感染复数为100/1的Hp活菌悬液培养24 h后4种细胞凋亡蛋白半胱天冬酶(Caspase)-9、Caspase-3和增殖蛋白E2F转录因子l、P21、P53表达情况;采用噻唑蓝比色法(MTT)测定4种细胞与Hp活菌悬液共同培养24、28 h后实验组与对照组的增殖活性抑制率;采用流式细胞仪测定4种细胞与Hp活菌悬液共同培养24 h后实验组与对照组的凋亡、增殖指数及细胞周期情况.结果 经Hp处理后,4种细胞的正常形态随着培养时间的延长、细菌数目增加均发生明显变化.经Hp处理24 h后,4种细胞凋亡及增殖蛋白表达水平均呈不同程度改变.加入Hp活菌悬液感染48 h后,4种细胞均受到增殖活性抑制,且在感染复数200/1的Hp活菌悬液影响下细胞增殖活性抑制率均明显高于感染复数100/1[MGC-803细胞:(40.2±3.8)％比(32.7±3.2)％,GES-1细胞:(63.7±3.6)％比(41.2±3.5)％,BGC-823细胞:(31.0土2.7)％比(22.7±2.2)％,SGC-7901细胞:(32.0±2.9)％比(27.3±25)％],差异均有统计学意义(均P＜0.05).经感染复数100/1的Hp活菌悬液感染24 h后,4种细胞的凋亡指数均明显高于相应对照组[MGC-803细胞:(2.6±0.9)比(0.5±0.5),GES-1细胞:(4.9±0.8)比(1.9±0.6),BGC-823细胞:(2.7±1.1)比(0.7±0.4),SGC-7901细胞:(2.2±0.6)比(0.9±0.6)],SGC-7901细胞的增殖指数明显低于相应对照组[(46.8±2.7)比(52.8±3.6)],MGC-803、GES-1、BGC-823细胞的增殖指数明显高于相应对照组[(43.2±1.7)比(42.0±1.6),(44.7±4.7)比(32.3±2.5),(52.8±2.8)比(41.6±1.3)],且这3种细胞G0/G1期细胞比例明显低于相应对照组[(57.8±3.6)％比(65.6±2.8)％,(55.1±2.4)％比(67.5±3.6)％,(47.0±3.4)％比(58.2±4.4)％],S期细胞比例明显高于相应对照组[(41.3±3.4)％比(33.2±2.5)％,(29.8±2.4)％比(19.9±1.6)％,(45.1±3.4)％比(22.4±2.3)％],差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 Hp可引起胃癌细胞及正常胃上皮细胞凋亡以及增殖紊乱.