川黄方对临床剂量三价砷肾毒性大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨川黄方对临床剂量三价砷肾毒性的抑制效应及机制.方法 将32只雄性Wistar大鼠分为正常组(A组)、模型组(B组)、川黄方组(C组)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(D组),每组8只;B、C、D组采用亚砷酸钠(NaAsO2)制备三价砷肾毒性大鼠模型,即每日腹腔注射10 mg/kg NaAsO2,共10d.C组于造模前5d每日川黄方水煎液灌胃,灌胃剂量为成人标准体质量(60kg)常规用量50倍;D组于造模前5d每日腹腔注射150 mg/kg的NAC.造模结束后24h处死动物,测定肾功能(SCr、BUN)、肝功能(ALT、AST),HE染色观察肾、肝病理改变,扫描电镜观察肾小管上皮细胞凋亡,Western印迹检测肾组织cleaved-caspase-3蛋白表达.结果 肾功能:与A组相比,造模后B组SCr、BUN均明显升高(P＜0.01);与B组相比,C、D组SCr、BUN明显降低(P＜0.05).肝功能:造模后各组ALT、AST比较差异无统计学意义(P＞0.05).病理形态学检测:HE染色提示B组大鼠肾组织出现明显肾间质水肿、肾小管上皮细胞胞质空泡样变,肝组织出现局灶性肝细胞水肿、局灶性炎细胞浸润;电镜提示B组肾小管上皮细胞空泡样变、线粒体肿胀和嵴断裂、肾小管上皮细胞凋亡增多;C、D组的肾组织病理改变明显减轻、肾小管和肾间质形态结构相对完整、凋亡细胞减少、肾小管上皮细胞空泡样变区域明显减少;肝组织结构基本正常.Western印迹检测:与A组相比,B组肾组织中cleaved-caspase 3蛋白表达显著增多(P＜0.01);与B组相比,C、D组肾组织中cleaved-caspase-3蛋白表达明显回落(P＜0.01).结论 川黄方能有效抑制临床剂量三价砷的肾脏毒性,其分子机制与抑制caspase 3参与介导的肾小管上皮细胞凋亡有关.