胎盘特异性蛋白-1在胎儿生长受限中的作用及机制研究

目的 探讨胎盘特异性蛋白-1(PLAC-1)在胎儿生长受限中的表达,以及PLAC-1表达下调后对人胎盘滋养层JEG-3细胞生物学行为的影响,明确PLAC-1在胎儿生长受限中的生物学作用.方法 收集20例胎儿生长受限和20例正常对照胎盘组织,免疫印迹法检测PLAC-1在对照组和胎儿生长受限组间表达差异;针对PLAC-1的靶序列合成3条反向互补的寡聚核苷酸序列,采用瞬时转染的方法转染人胎盘滋养层JEG-3细胞,48h后收取细胞,提取总蛋白,免疫印迹法验证siRNA干扰效果.选择敲低效果最佳的siRNA进行细胞表型实验,采用CCK-8、Transwell和细胞划痕等实验方法分别检测细胞增殖、迁移和侵袭情况.结果 (1)与对照组胎盘相比,胎儿生长受限组胎盘中PLAC-1蛋白的表达水平明显下调,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)siRNA的敲低效果:3条siRNA均具有PLAC-1的敲低效果,其中siPLAC1-1敲低效果最佳达到90％以上,选择siPLAC1-1进行后续的细胞表型实验.(3)CCK-8检测细胞增殖能力:分别在24、48、72h检测siCtrl和siPLAC-1两组细胞活性,在24h两者差异显著(P<0.05),48h和72h两者间差异极显著(P<0.01).(4)Transwell检测细胞迁移和侵袭能力:在迁移实验中,siPLAC-1组的穿膜细胞数为(67±3)个,明显少于siCtrl组(157±4)个(P<0.01);侵袭实验中,siPLAC-1组的穿膜细胞数为(25±5)个,明显少于siCtrl组(84±6)个(P<0.01).(5)细胞划痕实验检测细胞迁移:在72h时,siPLAC-1敲低组细胞迁移率为(18.1±2.4)％,对照组为(26.1±3.7)％,细胞迁移差异明显(P<0.05).结论 PLAC- 1在胎儿生长受限胎盘组织明显下调,通过RNAi在JEG- 3细胞中干扰PLAC- 1表达后,抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,进而影响胎盘发育异常导致胎儿生长受限的发生.