重组人β防御素-2基因对支气管肺发育不良新生鼠肺泡及肺血管发育的影响

目的 研究重组人β防御素-2(humanβdefensin-2,hBD2)对高氧诱导支气管肺发育不良(BPD)新生鼠肺泡及肺血管发育的影响.方法 将48只新生SD大鼠随机分为空气组、高氧组、空载体组和hBD2组,每组12只.大鼠暴露于90％高氧箱内14d建立BPD模型,hBD2组于第4天气管穿刺注入1×107/ml含有hBD2编码基因的重组腺病毒25μl,空载体组注入等量空载体腺病毒.于第7、14天采集肺组织标本,qPCR检测肺组织hBD2 mRNA表达;比较各组大鼠肺组织形态学变化,测定肺泡辐射状计数(RAC)和平均内衬间隔(MLI);免疫组化测定肺组织血管内皮生长因子(VEGF)表达,ELISA法测定肺组织炎症因子TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、IL-10表达水平.结果 梯度稀释法测定病毒滴度为1×109/ml,用稀释液稀释100倍得到1×107/ml.在大鼠出生后第7、14天,与hBD2组比较,空气组、高氧组、空载体组大鼠hBD2 mRNA表达水平均明显为低,差异均有统计学意义(均P<0.05);第7、14天,高氧组和空载体组大鼠的RAC、MLI、AOD值、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平与空气组、hBD2组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).HE染色及免疫组化染色结果显示高氧暴露后大鼠肺泡及肺血管发育受阻,hBD2组大鼠肺泡和肺血管发育改善.结论 hBD2基因治疗可促进高氧诱导BPD新生鼠的肺泡及肺血管发育,并减轻肺部炎症.