双氢青蒿素对MRL/lpr SLE小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响研究
Zhejiang Medical Journal(2018)
Abstract
目的探讨双氢青蒿素对MRL/lpr系统性红斑狼疮(SLE)小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响.方法从MRL/lpr SLE小鼠脾脏获取CD4+ T细胞,进行体外细胞双氢青蒿素干预培养.通过CCK-8实验检测双氢青蒿素的细胞毒性, 高效液相色谱技术检测CD4+ T细胞基因组DNA甲基化水平,RT-PCR和Western blot检测CD4+ T细胞DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、生长阻滞和DNA损伤基因a(Gadd45a)mRNA和蛋白表达水平.结果双氢青蒿素对SLE小鼠CD4+ T的半抑制浓度(IC50)为62μmol/L.双氢青蒿素可抑制CD4+ T细胞增殖,且随着浓度的增加,对CD4+ T细胞增殖的抑制作用增强.双氢青蒿素干预后,CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平显著升高;且双氢青蒿素浓度越高,基因组DNA甲基化水平越高.双氢青蒿素干预培养后,SLE小鼠CD4+ T细胞DNMT1 mRNA和蛋白水平均明显上调,而Gadd45a mRNA和蛋白水平均明显下调,其作用与浓度有关.结论双氢青蒿素可能通过DNA甲基化调控机制发挥治疗SLE的作用.
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