RNA干扰Livin基因对甲状腺乳头状癌的增殖及侵袭抑制作用及其分子机制

目的:探讨Livin对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡及侵袭的影响以及可能的调控分子机制.方法:构建靶向Livin基因的慢病毒shRNA载体,转染甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1,实验分为干扰组、阴性对照组和空白组.应用RT-PCR和Western印迹检测转染Livin-shRNA后细胞Livin mRNA和蛋白表达水平的变化.应用MTT、流式细胞仪、Western印迹与Transwell侵袭实验检测Livin对甲状腺乳头状癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响.并接种于裸鼠模型中,进一步确定Livin在体内对甲状腺乳头状癌细胞的影响.结果:慢病毒Livin-shRNA载体成功抑制TPC-1细胞中Livin mRNA和蛋白的表达;转染Livin-shRNA后TPC-1细胞的增殖能力受到明显抑制(P<0.01),转染Livin-shRNA组、阴性对照组和空白组的凋亡率分别为(15.72±0.21)%,(4.54±0.13)%和(4.87±0.22)%,三组比较差异均有统计学意义(P<0.01).干扰组穿膜细胞数明显少于阴性对照组和空白组(P<0.05).与空白组和阴性对照组相比,干扰组细胞AKT、p-AKT及PDK1蛋白表达量均下调(P<0.05),而PTEN蛋白明显上调(P<0.05).甲状腺乳头状癌裸鼠模型结果表明干扰组肿瘤的生长速度、肿瘤质量[(1.11±0.08)g]明显小于空白组[(1.90±0.15)g]和阴性对照组[(2.10±0.12)g].结论:沉默Livin基因能抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭及体内生长,促使甲状腺乳头状癌细胞凋亡的发生,可能是通过抑制PI3K-AKT信号转导通路来发挥作用.