吸入氢气对脓毒症小鼠海马组织DNA甲基化的影响

目的 评价吸入氢气对脓毒症小鼠海马组织的DNA甲基化状态的影响.方法 54只健康雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sepsis组)和氢气治疗组(Sepsis+H2组),每组18只.Sepsis组和Sepsis+H2组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备小鼠脓毒症模型,Sepsis+H2组小鼠于手术后1 h和6 h吸入用空气混合的2％氢气1 h,Sham组只开腹不进行盲肠结扎和穿孔.3组小鼠于假手术或CLP后1、3、7 d取小鼠海马组织,比色法测定全基因组DNA甲基化水平;实时定量PCR法检测DNA甲基化转移酶(DNMTs,包括DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)的mRNA水平;Western blot法检测DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白表达水平.结果 与Sham组比较,Sepsis组小鼠在建模后1、3、7 d海马组织全基因组甲基化水平明显下降(P<0.05),DNMT1和DNMT3a的mRNA和蛋白表达水平升高,DNMT3b的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与Sepsis组比较,Sepsis+H2组全基因组甲基化水平升高(P<0.05),DNMT1和DNMT3a的mRNA和蛋白表达水平下降,DNMT3b的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 吸入氢气可纠正脓毒症小鼠海马组织的DNA甲基化紊乱状态,改善DNA甲基化紊乱状态是氢气治疗脓毒症相关性脑病的重要机制之一.