IL-6、GATA6在大鼠肺动脉平滑肌细胞中的表达及对细胞增殖的影响

目的 探讨白细胞介素(IL)-6、转录因子GATA6在血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的表达及作用.方法 从8周龄SD大鼠中分离肺动脉,采用Ⅰ型胶原酶消化法原代培养PASMCs;采用倒置显微镜观察和免疫荧光染色鉴定细胞;采用CCK-8检测不同剂量(0、15、30、45、60、75μg/L)PDGF-BB分别作用12、24、48 h对PASMCs增殖能力的影响;采用流式细胞术检测30μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖48 h的细胞周期;应用qPCR和Western blot技术检测30μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖12、24、48 h后IL-6和GATA6 mRNA及蛋白的表达水平.结果 15～60μg/L的PDGF-BB诱导24 h、48 h后PASMCs增殖显著,其中以30μg/L诱导48 h效果最佳(P<0.05);流式周期结果表明,PDGF-BB组G1期的百分比较对照组降低,而S期和G2期百分比增高(P<0.01).PDGF-BB能够诱导细胞增加IL-6 mRNA和蛋白的分泌并降低GATA6 mRNA和蛋白表达水平.相关性分析提示PASMCs的增殖与IL-6 mRNA表达呈正相关,与GATA6 mRNA表达呈负相关(r分别为0.538和-0.647,均P<0.05);IL-6与GATA6的表达呈负相关(r=-0.705,P<0.01).结论 PDGF-BB诱导体外培养的PASMCs增殖;IL-6、GATA6参与了PDGF-BB诱导PASMCs增殖的发生和发展;PASMC增殖与IL-6 mRNA表达上调和GATA6 mRNA表达下调有关.