T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用研究

目的 探讨T-钙黏蛋白联合顺铂对黑色素瘤顺铂耐药株的作用.方法 采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导建立小鼠黑色素瘤B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-R B16F10).MTT法检测CDDP-R B16F10的增殖能力.将T-钙黏蛋白转染肿瘤细胞.分别采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化SP法检测转染后T-钙黏蛋白mRNA和蛋白的表达.实验将CDDP-R B16F10细胞分为空白对照组、pEGFP-N1组、pEGFP-N 1-T-cadherin组、顺铂组、pEGFP-N1联合顺铂组、pEGFP-N1-T-cadherin联合顺铂组.采用Wound-healing划痕实验和transweH侵袭实验检测T-钙黏蛋白联合顺铂对CDDP-R B16F10细胞迁移和侵袭力的影响.结果 成功建立黑色素瘤顺铂耐药细胞株.MTT法结果显示,CDDP-R B16F10细胞增殖能力与B16F10细胞相比差异无统计学意义(P＞o.05).RT-PCR和免疫组化SP法检测表明,转染后细胞可稳定转录和表达T-钙黏蛋白.pEGFP-N 1-T-cadherin联合顺铂组细胞迁移率和穿膜细胞数低于pEGFP-N 1-T-cadherin组(P＜0.05),而pEGFP-N1-T-cadherin组低于空白对照组、pEGFP-N1组、顺铂组和pEGFP-N1联合顺铂组(P＜0.05).析因分析显示,T-钙黏蛋白与顺铂联合对CDDP-R B16F10细胞迁移率及侵袭力的抑制有交互作用(P＜0.05).结论 T-钙黏蛋白可恢复顺铂对黑色素瘤顺铂耐药细胞株迁移及侵袭力的抑制作用.