microRNA-125b在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子水平相关性

目的 探讨microRNA-125b(miR-125b)在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子的相关性.方法 腹腔注射脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤大鼠模型,对照组注射等量的生理盐水(n=20);各模型组(n=20)大鼠注射LPS 4、8、12及24 h后取其肺组织,HE染色观察病理学变化;PCR检测各组各时点肺组织中miR-125b、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-6(IL-6)变化.Pearson相关性分析实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α、IL-6水平的相关性.NR8383细胞培养后分组,对照组不进行LPS刺激,实验组加入LPS刺激4 h、8 h、12 h及24 h时收集细胞,检测各组miR-125b、TNF-α与IL-6的含量变化.另NR8383细胞设3组,阴性对照组只转染空表达质粒,miR-125b mimic组转染miR-125b mimic表达质粒,miR-125b inhibitor组转染miR-125b inhibitor质粒.PCR测各组细胞中miR-125b表达情况,Western blot测Notch1的表达情况.结果 LPS各处理组大鼠模型肺组织严重出血、水肿及大量炎症细胞浸润.与对照组比较,在注射LPS 4、8、12以24 h后,实验组大鼠肺组织中miR-125b显著降低;而肺组织中TNF-α与IL-6水平则升高,其中在LPS注射4 h后,TNF-α与IL-6的表达水平达到峰值(P<0.05).实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α及IL-6呈负相关(r分别为-0.599、-0.580;P<0.05).在LPS诱导的第4、8、12、24 h,实验组NR8383细胞系miR-125b表达水平均低于对照组,而TNF-α、IL-6的表达水平均高于对照组(P<0.05).与阴性对照组比较,miR-125b mimic组miR-125b相对表达量升高、Notch1蛋白相对表达量则降低(P<0.05),miR-125b inhibitor组miR-125b相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与miR-125b mimic组比较,miR-125b inhibitor组miR-125b相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高(P<0.05).结论 在脓毒症急性肺损伤中,microRNA-125b可能通过调控Notch1蛋白的表达,影响炎症因子TNF-α与IL-6的表达,参与其免疫炎症调控过程.